针对肌钙蛋白i的抗体及其使用方法
2020-01-08

针对肌钙蛋白i的抗体及其使用方法

本发明涉及针对肌钙蛋白I的抗体及其使用方法。特别地,此种抗体可以用于检测患者中的肌钙蛋白I,并且还可以用于例如心肌梗死或急性冠状动脉综合征的诊断中。 PTA-9816 20090211

X9是A或T;和

如本文使用的,术语"⑶R"指在抗体可变序列内的互补性决定区。在重链和轻链的每个可变区中存在3个CDRs,所述CDRs对于每个可变区命名为CDRUCDR2和CDR3。如本文使用的,术语"⑶R组"指在能够结合抗原的单个可变区中出现的3个⑶Rs的组。这些⑶Rs的确切边界已根据不同系统不同地限定。由Kabat(Kabat等人,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD(1987)和(1991))描述的系统,不仅提供了可应用于抗体的任何可变区的明确残基编号系统,还提供了限定3个⑶Rs的精确残基边界。这些⑶Rs可以被称为Kabat⑶Rs。Chothia和同事(Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901_917(1987)以及Chothia等人,Nature342:877-883(1989))发现Kabat⑶Rs内的某些亚部分采取几乎相同的肽主链构象,尽管在氨基酸序列水平上具有大的多样性。这些亚部分命名为L1、L2和L3或H1、H2和H3,其中"L"和"H"分别指轻链和重链区域。这些区域可以被称为Chothia⑶Rs,所述Chothia⑶Rs具有与KabatCDRs重叠的边界。与KabatCDRs重叠的限定CDRs的其他边界已由Padlan(FASEBJ.9:133-139(1995))和MacCallum(JMolBiol262(5):732-45(1996))描述。再其他的⑶R边界定义可能不严格地遵循上述系统之一,例如AbM定义,但仍将与Kabat⑶Rs重叠,尽管按照特定残基或残基组或甚至整个CDRs并不显著影响抗原结合的预测或实验发现,它们可以缩短或加长。本文使用的方法可以利用根据这些系统中的任何一种限定的CDRs,尽管优选实施方案使用Kabat、AbM或Chothia限定的CDRs。

如本文使用的,术语"分离的多核苷酸"应意指下述多核苷酸(例如,基因组的、cDNA、或合成来源的,或其某一组合),由于其来源,不与在自然界中发现"分离的多核苷酸"与之结合的全部或部分多核苷酸结合;与在自然界中它不与之连接的多核苷酸可操作地连接;或在自然界中不作为较大序列的部分存在。

www.unizh.ch/.about.honegger/AH0sem-inar/Slide01.html;

X3是S或T;

www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat_aim.html;www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html;

本发明的抗体的⑶Rs显示于下表1和2中:

PCR单重叠序列延伸(S0E)用于组合可变重(VH)和可变轻(VL)基因用于Tnl19C7scFv构建体(图2,以及SEQIDNOs:54和55)。使用载体限制位点Sfil和Xhol,将Tnl19C7scFvDNA克隆到酵母展示载体pYD41内。将pYD41-TnI19C7scFv载体转化到DH5a大肠杆菌内。随后从大肠杆菌中分离质粒DNA,并且测序Tnl19C7scFv插入片段,以确保scFv与AGA2蛋白质符合读框地克隆。

为了本发明可以更容易地理解,选择的术语在下文定义。